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本生帶您了解、TAE緩沖液與TBE緩沖液的作用區(qū)別

更新時(shí)間:2023-05-06    點(diǎn)擊次數(shù):1239

  本生帶您了解、TAE緩沖液與TBE緩沖液的作用區(qū)別


  分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的電泳緩沖液主要有三種:TAE、TBE和TPE。TBE與TPE緩沖容量高,DNA分離效果好,但TPE會(huì)導(dǎo)致DNA片段回收時(shí)含磷酸鹽濃度高,容易使DNA沉淀。TAE緩沖容量低,但價(jià)格較便宜,TBE緩沖液含有的EDTA可螯合二價(jià)陽(yáng)離子,可抑制DNase活性,防止PCR擴(kuò)增產(chǎn)物降解。

  TAE緩沖液的特點(diǎn):

  TAE是使用泛的緩沖系統(tǒng)。其特點(diǎn)是超螺旋在其中電泳時(shí)更符合實(shí)際相對(duì)分子質(zhì)量(TBE中電泳時(shí)測(cè)出的相對(duì)分子質(zhì)量會(huì)大于實(shí)際分子質(zhì)量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,電泳大于13kb的片段時(shí)用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時(shí)也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的缺點(diǎn)是緩沖容量小,長(zhǎng)時(shí)間電泳(如過夜)不可選用,除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。

  TBE緩沖液的特點(diǎn):

  TBE 緩沖液也是常用的核酸電泳緩沖鹽溶液,主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。TBE的主要成分是Tris-硼酸鹽與EDTA,緩沖能力強(qiáng),適合較長(zhǎng)時(shí)間電泳,分辨率較高,電泳小于1kb的片段時(shí)分離效果好。TBE 緩沖液中的硼酸成分會(huì)影響DNA回收效率以及后續(xù)的酶反應(yīng),TBE用于瓊脂糖凝膠時(shí)易造成高電滲作用,并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價(jià)結(jié)合的四羥基硼酸鹽復(fù)合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收電泳中使用。若要進(jìn)行DNA片段的瓊脂糖凝膠電泳回收實(shí)驗(yàn),建議使用TAE 緩沖液。

  緩沖液 本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。


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