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大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒技術(shù)說明書
以下是關(guān)于大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒的技術(shù)說明書核心內(nèi)容:
一、檢測原理?
采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。預(yù)先包被抗體的微孔板捕獲樣本中的Flt3L,依次加入HRP標(biāo)記檢測抗體和TMB底物顯色,顏色深淺與目標(biāo)物濃度呈正相關(guān),450nm波長測定OD值。
二、關(guān)鍵參數(shù)?
項目? ?規(guī)格?
檢測范圍 1.0-50 ng/mL
靈敏度 檢測限1.0 ng/mL
樣本類型 血清/血漿/組織勻漿/細(xì)胞上清
反應(yīng)時間 37℃孵育1小時
標(biāo)準(zhǔn)品濃度 80/40/20/10/5/2.5 U/L(梯度稀釋)
三、樣本處理?
血清/血漿?
采集后1000×g離心10分鐘(血清)或30分鐘(血漿)
避免溶血或高脂血,-70℃分裝保存
組織勻漿?
按1:9比例加入生理鹽水勻漿,1000×g離心10分鐘取上清
細(xì)胞上清?
去除顆粒物后直接檢測,或-20℃短期保存
四、操作步驟?
試劑平衡至室溫(20-25℃)
加樣順序:標(biāo)準(zhǔn)品/樣本→生物素化抗體→酶結(jié)合物
37℃避光孵育1小時
洗板5次,拍干后加入TMB顯色15分鐘
終止反應(yīng)后15分鐘內(nèi)讀取OD值
五、注意事項?
質(zhì)量控制?:每板需設(shè)空白孔和標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔
干擾規(guī)避?:避免反復(fù)凍融樣本,溶血/脂血樣本需預(yù)處理
洗滌要求?:手工洗板需充分拍干,防止交叉污染
六、保存條件?
未開封試劑盒:2-8℃保存,有效期6個月
已開封組分:標(biāo)準(zhǔn)品需-20℃保存,其他4℃存放
完整說明書可聯(lián)系供應(yīng)商獲取,如雅吉生物或南京賽泓瑞。
注:以上資料僅供參考,具體詳情來咨詢技術(shù) 老師或品牌供應(yīng)商。
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