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使用胎牛血清的常見(jiàn)誤區(qū)有哪些?
使用胎牛血清時(shí)常見(jiàn)的誤區(qū)主要包括以下幾點(diǎn):
?儲(chǔ)存條件不當(dāng)?:
誤區(qū):將血清長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃環(huán)境中,或反復(fù)凍融。
正確做法:?血清應(yīng)長(zhǎng)期保存在-20℃以下?,避免反復(fù)凍融。若需頻繁使用,可在4℃下短期保存(不超過(guò)一個(gè)月),但應(yīng)盡快用完并避免污染。
?解凍方法不正確?:
誤區(qū):直接將血清從冷凍狀態(tài)置于室溫或高溫水浴中快速解凍。
正確做法:?推薦采用梯度融化方法?,先將血清置于4℃冰箱中融解,或在室溫下緩慢解凍,并規(guī)則地?fù)u晃均勻。避免使用高溫水浴快速解凍,以減少沉淀的產(chǎn)生。
?處理絮狀沉淀不當(dāng)?:
誤區(qū):認(rèn)為絮狀沉淀是有害的,必須過(guò)濾去除。
正確做法:?絮狀沉淀主要由纖維蛋白和脂蛋白組成,是正?,F(xiàn)象,不影響血清質(zhì)量???梢酝ㄟ^(guò)離心(如400g,1-2分鐘)將沉淀沉至瓶底,然后小心地將上清液轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶中。大多數(shù)情況下,輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。不建議使用過(guò)濾方法去除沉淀,因?yàn)榭赡軙?huì)堵塞濾膜?。
?未考慮血清的適用性?:
誤區(qū):盲目選擇血清品牌,不考慮實(shí)驗(yàn)的具體需求和細(xì)胞的適應(yīng)性。
正確做法:?在選擇血清時(shí),應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)的具體需求、細(xì)胞的生長(zhǎng)特性和血清的來(lái)源、質(zhì)量等因素???梢韵忍崛∫徊糠旨?xì)胞進(jìn)行試用,按照比例替換血清,以觀察細(xì)胞的適應(yīng)情況。
?忽視無(wú)菌操作?:
誤區(qū):在儲(chǔ)存、解凍和使用血清過(guò)程中忽視無(wú)菌操作。
正確做法:?整個(gè)操作過(guò)程應(yīng)在無(wú)菌操作臺(tái)中進(jìn)行,注意無(wú)菌操作?,以避免污染。
?對(duì)血清滅活處理的理解不足?:
誤區(qū):認(rèn)為所有情況下都需要對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。
正確做法:?血清滅活不是強(qiáng)制要求,客戶可以自行選擇是否進(jìn)行?。滅活條件為水浴溫度56℃,30分鐘。但需注意,滅活后的血清可能會(huì)出現(xiàn)沉淀變多的現(xiàn)象。溶液
通過(guò)避免這些常見(jiàn)誤區(qū),可以更有效地利用胎牛血清進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),提高實(shí)驗(yàn)效果和數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
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